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            腸炎動物模型 消化系統模型

            腸炎動物模型 / 消化系統模型

                   現如今,有多種動物實驗模型被廣泛用于研究炎癥性腸炎(inflammatory bowel disease, IBD)的病因、發病機制及測 試新開發藥物藥效等,尤其以葡聚糖硫酸鈉鹽(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS)結腸炎(ulcerative colitis,UC)模型應用最廣。


            模型發展歷程 

            模型特點

                   使用小鼠、大鼠、倉鼠、豚鼠或豬、兔等動物均可造模,通過給予動物自由飲用不同濃度的DSS水溶液,根據用藥時間及 用藥周期可制成急性和慢性兩種結腸炎模型。該模型癥狀表現與人類UC極為相似,主要表現為腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動度減少,毛色變差等。

            實驗方法(以小鼠動物模型為例說明) 

            實驗候選動物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每組至少8-10只小鼠。 

            造模試劑:DSS,Mw 36000-50000,含硫量16-20%。 

            DSS濃度:急性期模型通常為3-5%,慢性期模型通常為1-3%;可根據實驗需求及動物類型摸索濃度。該濃度為質量體積 比,使用飲用水配置后,過濾除菌。 

            急性DSS結腸炎模型 

            Day1:稱重并標記各組C57BL/6小鼠。待造模小鼠飲用3-5% DSS水溶液,未處理組小鼠飲用正常水。 

            Day3:給予待造模小鼠更換新鮮3-5%DSS飲用水。 

            Day5:給予待造模小鼠更換新鮮3-5%DSS飲用水。 

            Day8:給予待造模小鼠更換新鮮不含DSS的飲用水。 

            慢性DSS結腸炎模型 

            Day1:稱重并標記各組C57BL/6小鼠。待造模小鼠飲用1-3% DSS水溶液,未處理組小鼠飲用正常水。 

            Day3:給予待造模小鼠更換新鮮1-3%DSS飲用水。 

            Day5:給予待造模小鼠更換新鮮1-3%DSS飲用水

            Day8:給予待造模小鼠更換新鮮不含DSS的飲用水。 

            Day22-Day26:重復Day1-Day5操作。 

            Day29:給予待造模小鼠更換新鮮不含DSS的飲用水。 

            Day43-Day47:重復Day1-Day5操作。 

            Day50:給予待造模小鼠更換新鮮不含DSS的飲用水。



            DSS UC model 如何評價造模是否成功? 

            1). 疾病活躍指數評分 Disease Activity Index, DAI score 從三個方面進行評估打分,分別為體重、糞便粘稠度、糞便潛血等指標,評分細則見表-3。其中,糞便潛血測試可使用尿糞 隱血檢測試劑盒 (聯.苯.胺法)(Yeasen,60403ES60)。DAI評分為三個指標之和。



            2). 組織學變化評分

            a)潰瘍形成個數:無—0,1個潰瘍—1,2個潰瘍—2,3個潰瘍—3,>3個潰瘍—4 

            b)上皮細胞變化:正常—0,杯狀細胞缺失—1,杯狀細胞大面積缺失—2,隱窩缺失—3,隱窩大面積缺失 或息肉狀再生—4 

            c)炎癥浸潤:無—0,隱窩周圍浸潤—1,黏膜肌層出現浸潤—2,黏膜肌層普遍浸潤,黏膜增厚—3,黏膜 下層浸潤—4 

            d)淋巴結形成:無—0,1個淋巴結—1,2個淋巴結—2,3個淋巴結—3,>3個潰瘍—4 

            組織學變化評分為上述各指標之和,在急性結腸炎模型中淋巴結形成不做評分。組織學分析的標準方法為HE染色 (Yeasen, 60524ES60)。

            DSS潰瘍性結腸炎組織學變化模擬圖 


            2). 結腸長度 急性結腸炎模型中,第8天可檢測到結腸長度縮短;慢性結腸炎模型中,結腸長度縮短更加明顯。 

            3). 總結 

            DSS UC動物模型構建應先進行預實驗,摸索建模條件,建議預實驗每組小鼠8-10只,并設立對照組。通常出現體重減 輕、稀便、腹瀉、血便或糞便潛血、潰瘍可視為DSS藥物有效,造模成功。

            需確認的信息 

            1.模型種屬(大鼠還是小鼠或是其他種屬

            2.動物體重有無要求,年齡有無要求 

            3.雌雄有無要求 

            4.模型構建具體方案 

            5. 取材要求(采血、取組織樣本)

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