坐骨神經損傷 （周圍神經損傷）動物模型

周圍神經損傷后影響外周神經修復的因素是神經生物學領域研究的熱點。已知的證據表明，周圍神經受損 后參與神經再生的主要因素包括神經中樞和神經局部的微環境。本章建立了坐骨神經損傷動物模型，研究 切斷坐骨神經后行為學的變化情況，為進一步研究神經損傷修復的機制及策略提供基礎。 

物種： 

Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 

來源： 

夾閉坐骨神經干導致坐骨神經損傷 

模式動物品系： 

SPF級SD大鼠，雄性，8 周 

實驗分組： 

隨機分組：對照組，模型組，陽性藥物組，受試藥物組(三個劑量梯度組)，15只每組 

建模方法： 

1、對雄性大鼠行腹腔注射麻醉。將大鼠俯臥位固定于鼠固定架上，鋪孔巾，暴露鼠左下肢并剪掉鼠 毛。 

2、碘酒、酒精消毒三遍，于左側股后正中行縱行、長約6-8mm切口，暴露皮下肌肉。 

3、用止血鉗鈍性分離股二頭肌、半腱肌、半膜肌后，分離出白色、粗大的坐骨神經，刺激后左足出現 抽動。 

4、距坐骨結節6-8mm處（定位）；用大止血鉗夾閉坐骨神經干，壓滿3扣；擠壓5秒鐘后松開止血鉗， 間隔10秒后再夾閉5秒鐘，再放松10秒，第三次再夾閉5秒（定時）。 

5、神經干擠壓傷寬度約3mm。9-0無創縫線標記后，將坐骨神經送回原位，整理肌肉，縫合創口；假手 術組大鼠麻醉后，僅切開皮膚暴露左側坐骨神經但不做鉗夾，在相應部位相同方法標記后縫合。 

后期取材： 

取出的動物飼養一周，結束后，注射水合氯醛麻醉大鼠，將鼠仰臥位固定于大鼠固定架上。自頜下 至小腹行胸、復聯合切口，切斷肋骨，剪斷膈肌，暴露出跳動的心臟。用16號針頭由左心尖刺入左心室， 用軟靜脈留置導管沿左心室經主動脈瓣插入主動脈，剪開右心耳。

先用0.9%生理鹽水250ml快速沖洗組織內血液，其后用4%哆聚甲醛固定液快速推注100ml，再緩慢推 注100ml，直至使鼠尾巴翹起，身體逐漸僵硬，顏色變白為止。灌注后，立即將身體一僵硬的鼠于俯臥位 固定于手術臺上，由胸-骶部沿脊柱正中切開，暴露及分離背部肌肉，沿十二肋肌部切斷T12 L1水平脊 柱、脊髓。沿坐骨神經走行切腰4、腰5、骶1段脊髓和包括擠壓傷在內的上下各2mm的坐骨神經。 

同法切取假手術組的相應部位等長標本。分三種方法進行處理及固定。 

(1)4%哆聚甲醛固定液中固定，制備石蠟切片。 

(2)2.5%戊2醛液固定后，備做電鏡。 

(3)液氮中冷凍，備做冰凍切片。