一、實驗原理
DAPI 為一種熒光染料,可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈DNA結合而發揮標記的作用,可以產生比DAPI自身強20多倍的 熒光,和EB相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞,熒光顯微鏡觀察細胞標記 的效率高(幾乎為100 %) ,且對活細胞無毒副作用。DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。 DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。細胞經熱激處理后用DAPI染色3分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細胞核的形態變化。
二、實驗過程
1、用PBS按照1(原液):5000(PBS)稀釋DAPI原液
2、吸去細胞怕片上的細胞培養基,PBS清洗三次(不能讓細胞干透)
3、用3.7%甲醛固定細胞10min
4、吸去固定劑,用PBS沖洗三次,每次5min
5、用0.2% Triton X-100使得細胞透化處理5min
6、吸去Triton,PBS清洗3次,每次5min
7、DAPI工作液室溫下染色1-5min
8、吸去工作液,PBS清洗三次。
9、成像
收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電咨詢!
做實驗,找碩璽!您的科研生涯,我們一路相伴!
【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動 物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導、SCI、核 心期刊等服務。
【碩璽生物】已開展了數千個實驗外包項目。我們專注于醫學課題研究,已從課題申請、方案設計、試劑 采購、模型構造、標本檢測、數據分析、以及對SCI撰寫與發表的支持,各個環節積累了數千個成功案例 經驗,為數千個來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關實驗服務信息請咨詢碩璽生物。