實驗技術簡介：

       Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發。都在461nm處發出藍靛色熒光光。Hoechst染色時無需用 DAB來顯色，它直接結合細胞的DNA ，經過紫外光激發后發出藍色熒光。 

實驗技術原理： 

       Hoechst是可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較 低。 熒光染料Hoechst能少許進入正常細胞 膜，使其染上低藍色，而凋亡細胞的膜通透性增強，因此進入凋亡細胞中的Hoechst比正常細胞的多，熒光強度 要比正常細胞中要高，此外，凋亡細胞的染色體DNA的結構發生了改變從而使該染料能更有效地與 DNA結合，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不 能有效地將Hoechst排出到細胞外使之在細胞 內積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。 

實驗操作流程： 

1、可貼壁細胞生長于含有蓋玻片的培養皿中,或將非貼壁細胞懸浮培養； 

2、將HOECHST加入培養皿,終濃度為10ug/ml,37℃孵育30min； 

3、加入4%PF,與培養液1:3混合,固定細胞5-10min； 

4、固定后將長有細胞的蓋玻片用封片劑封于載玻片； 

5、熒光顯微鏡下觀察。 

客戶提供： 

1、組織樣品：新鮮組織放入液氮或-80度保存，組織不少于100mg； 

2、培養細胞：通過細胞計數取不少于2×106個細胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混勻后保 存于冰箱（-80℃，避免反復凍融）； 

3、血液細胞標本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑， 保存（-80℃可長期保存，避免反復凍融）； 

4、血清或細胞培養液標本：離心去掉雜質后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可長期保 存，避免反復凍融）； 

5、石蠟切片，冰凍切片以及細胞爬片，涂片等。 

6、樣本運輸：可選擇以下任何一種方式寄送標本 - 組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后，加冰袋寄送； - 細胞樣本也可直接寄送培養瓶（密封保證不污染、培養液不漏出）； - 血清或上清液直接加冰袋寄送（送視路程遠近2-3天可到達）。 

交付標準： 

1、圖片；

2、完整項目報告（材料、試劑、儀器、方法、數據分析、實驗結果）。 

其他： 

1、Hoechst能與DNA結合，干擾DNA復制和細胞分裂，因此有致畸和致癌危險。使用和廢棄需謹慎。 

2、對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待 染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。 

3、熒光物質均易發生淬滅，染色后的樣品宜避光保存。 

收費標準/服務周期/提供結果： 

歡迎咨詢詳談，我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。 

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